选择近半年内未取过卵母细胞的爪蟾，冰浴30-45min，待其四肢麻痹，翻正反射消失后，在其下腹部正中皮肤及内部肌肉处切一个0.5-1cm的小口，拉出宫瓣，剪出试验所需量的爪蟾卵母细胞，置于含OR2溶液（41mmol/LNaCl，1mmol/LKCl，0.5mmol/LMgCl2，2.5mmol/LHEPES）的培养皿中待用，缝合爪蟾的肌肉及皮肤，置于浅水中（注意使其头部露在水面上方），使其自然苏醒
2025-12-31 admin
通过高压电场瞬时改变细胞膜通透性，实现大分子（如质粒DNA）高效跨膜转运。定向电穿孔可靶向特定脑区（如单侧或双侧），适用于神经发育与功能研究（Haas et al., 2002）。
2025-12-31 admin
原理
单细胞电穿孔（Single cell electroporation, SCE）通过局部高压电场诱导细胞膜瞬时去极化，形成纳米级孔道（孔径1-10 nm），实现大分子（DNA、RNA、蛋白质等）靶向递送。该技术结合电泳效应与细胞膜动态修复机制，适用于单细胞精度基因操作（Haas et al., 2001）。
2025-12-31 admin
爪蟾卵母细胞的分离与培养（1）消化试剂胶原酶：Sigma公司的CollegenaseTypeⅠ，将其溶于0Ca的ND96溶液配制成消化液。胶原酶溶液的浓度使用1mg/mL。（2）爪蟾卵母细胞的提取方法取健康非洲爪蟾一只，可选用麻醉剂MS222或者直接采用冰麻的方法（将其掩埋于碎冰块中20～30分钟），等待其麻醉，检验方法是用力捏其后肢趾,如果它没有较强的伸缩反应,说明它已经麻醉好了。将已经麻醉好的
2025-05-08 admin
