过去在使用反义(antisense)抑制实验来探讨基因功能时,常因为反义核酸的不稳定、专一性差或效率低等问题,而造成实验的限制。美国GeneTools公司独家推出的MorpholinoOligo,将可解决这些困扰研究人员以久的缺陷,让您的实验更加简便而精确。Morpholinooligo是将6碳环之Morpholine接上硷基后,以非离子性的phosphorodiamidate连接而成(如下图所示
2025-12-31 admin
100X Steinberg’s Stock119g HEPES34g NaCl2.06g magnesium sulfate•(7 H2O)0.8g calcium nitrate•(4 H2O)0.5g potassium chloride
2025-12-31
配制流程初始溶解:取8 mL超纯水(18.2 MΩ·cm),依次溶解上述成分,磁力搅拌至完全溶解。pH调节:使用甲磺酸铯(CsOH)将溶液pH精确调整至7.2±0.05(25℃)。渗透压校准:加入超纯水定容至10 mL,确保溶液渗透压为250±2 mOsm/kg(冰点渗透压计验证)。分装存储:分装至500 μL无菌冻存管,-80℃避光保存,有效期30天。
2025-12-31
选择近半年内未取过卵母细胞的爪蟾,冰浴30-45min,待其四肢麻痹,翻正反射消失后,在其下腹部正中皮肤及内部肌肉处切一个0.5-1cm的小口,拉出宫瓣,剪出试验所需量的爪蟾卵母细胞,置于含OR2溶液(41mmol/LNaCl,1mmol/LKCl,0.5mmol/LMgCl2,2.5mmol/LHEPES)的培养皿中待用,缝合爪蟾的肌肉及皮肤,置于浅水中(注意使其头部露在水面上方),使其自然苏醒
2025-12-31 admin
通过高压电场瞬时改变细胞膜通透性,实现大分子(如质粒DNA)高效跨膜转运。定向电穿孔可靶向特定脑区(如单侧或双侧),适用于神经发育与功能研究(Haas et al., 2002)。
2025-12-31 admin
原理
单细胞电穿孔(Single cell electroporation, SCE)通过局部高压电场诱导细胞膜瞬时去极化,形成纳米级孔道(孔径1-10 nm),实现大分子(DNA、RNA、蛋白质等)靶向递送。该技术结合电泳效应与细胞膜动态修复机制,适用于单细胞精度基因操作(Haas et al., 2001)。
2025-12-31 admin
照明的要求应该使用全光谱荧光灯泡,离水槽表面大约一米,并设成自动12小时/12小时的光/暗周期。总体而言,暴露于自然光有助于提高卵的质量。这样也可以降低四季气候和光照变化对爪蟾配对的影响。
2025-09-25 admin